Bst 4.0 HNB Bead試劑為全組分凍干品試劑，包含了標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)緩沖液、

HNB 染料、Mg2+、dNTP、Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶等，

使用時只需要加入引物、模板即可進行核酸恒溫擴增。

Bst 4.0 DNA/RNA 聚合酶具有依賴于 RNA 模板的聚合酶

活性（逆轉(zhuǎn)錄），還具有依賴于 DNA 的聚合酶活性，因此

無論 DNA 或 RNA 樣本均可使用該制品進行高效的恒溫

擴增。該制品是進行 LAMP 及 RT-LAMP 擴增反應(yīng)的

試劑。優(yōu)化的反應(yīng)體系，確?？焖俚耐瓿蓹z測試劑的反應(yīng)

體系建立。

在 LAMP 擴增起始前 HNB 染料與 Mg2+結(jié)合表現(xiàn)出

肉眼可見的紫羅蘭色，當(dāng)陽性擴增發(fā)生時 Mg2+被 LAMP

反應(yīng)的副產(chǎn)物焦磷酸螯合，HNB 染料無法與 Mg2+結(jié)合表

現(xiàn)出肉眼可見的天藍色。由此判斷天藍色為陽性擴增。該

顯色方法受樣本緩沖鹽、pH 等影響較小，適用的樣本較

pH 顯色法通用性更強。

貨 號 名 稱 規(guī)格

A3828-04 Bst4.0 HNB Bead 100 個

儲存：-20℃保存 2 年；室溫（25℃）保存>6 個月。

使用凍干微球進行全擴增體系用品的制備方法：將優(yōu)化的

擴增引物分裝于 0.2 ml EP 管底部，于 70-80℃條件烘干

1-2h。烘干后的 0.2 ml EP 管已經(jīng)含有干燥的擴增引物，

再加入一粒凍干微球即可制備成全擴增體系干燥品，該干

燥品無需冷鏈運輸，可長期保存。

反應(yīng)體系說明：每一個凍干微球為按照 25 μl 反應(yīng)體系建

立，在使用時只需要加入 25 μl 的 ddH2O 或模板即可進

行反應(yīng)。

使用實例：

1. 配制反應(yīng)體系

在 0.2 ml EP 反應(yīng)管中加入下述試劑

Bst4.0 HNB Bead 1 粒

10xLAMP Primer Mix 2.5 μl

模板 DNA/RNA X μl

ddH2O 到液體總量 25 μl

10xLAMP Primer Mix 濃度：FIP/BIP 分別為 16 μM、

LoopF/B 分別為 8 μM、F3/B3 分別為 2 μM

2. 反應(yīng)體系配好后，置于65°C進行反應(yīng)25~45min。肉

眼觀察結(jié)果，天藍色為陽性，紫羅蘭色為陰性。

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